PREGUNTAS FRECUENTES

Si la sangre extraída de una vena en un tubo se deja sola, los elementos de forma que contiene colapsan junto con los factores de coagulación y se forma el coágulo; La parte líquida por encima del coágulo también es el suero. La coagulación de la sangre puede prevenirse con unas sustancias llamadas anticoagulantes, por lo que si la sangre prevenida con anticoagulantes se deja en un tubo, los elementos moldeados se separan depositándose en el fondo, la parte superior líquida es el plasma. El plasma sanguíneo es la porción líquida de sangre que viaja por las venas. La diferencia entre el suero y el plasma es que no contiene algunos factores de coagulación, especialmente fibrinógeno. La bilirrubina y los carotenos dan al suero un color amarillo.

Secuencia de tubos recomendada para la extracción de sangre:

1. Hemocultivo 2. Coagulación 3. Gel / Suero sin gel 4. Heparina en gel / sin gel 5. EDTA 6. Glucosa 7. Otros.

Inmediatamente después de la extracción de sangre, invierta lentamente los tubos y vuelva a colocarlos en posición vertical para asegurarse de que el aditivo y la sangre estén bien mezclados. Este doble movimiento es un ciclo completo. Preste atención al número de ciclos recomendados según los tubos utilizados.

Las áreas de uso de los tubos de extracción de sangre al vacío son las siguientes, según sus colores.

Con tubos de EDTA (MOR); Se realizan pruebas de hemograma, reticulocito, fórmula leucocitaria, grupo sanguíneo, prueba cruzada, Coombs directo, Coombs indirecto.

Con tubos de citrato (AZUL); PT, aPTT, fibrinógeno, dímero D, factores de coagulación (FII, FV, FVII, FVIII, FIX, FX, FXI, FXII, FXIII), colágeno-ADP, colágeno-epinefrina, proteína C, proteína S, ATIII, TT, Se estudian el anticoagulante lúpico, VWF: Ag y VWF: RiCoF, antifactor Xa.

La prueba de sedimentación funciona con tubos con tapa negra (citratados).

Tubos de suero (amarillo-rojo); Se utiliza para muchas pruebas como Bioquímica-Hormonas-Microbiología-Serología-Inmunología-Banco de sangre.

Tubos de heparina (verde); Otros análisis que requieren NT-ProBNP y plasma se utilizan para el análisis bioquímico. La heparina de sodio se usa para el nivel de litio. Se usa heparina de sodio o litio para el nivel de amoníaco.

Tubos de glucosa (gris); Se utiliza en el almacenamiento a largo plazo de algunas sustancias como la medición de glucosa y el etanol. Los agentes antiglicolíticos retienen la glucosa hasta por 5 días.

La centrifugación es básicamente un método de separación. Utilizando la fuerza centrífuga obtenida del movimiento de rotación, las partículas de la muestra se separan según su forma, tamaño y densidad.

La centrifugación es una de las etapas importantes de la fase de preanálisis, y se debe extraer la sangre adecuada para garantizar una centrifugación correcta y saludable, y el suero debe colocarse en la centrífuga y separarse antes del tiempo especificado.

Para obtener plasma; Las muestras con EDTA, heparina, fluoruro o citrato se pueden centrifugar sin esperar. Para obtener suero; Los tubos rectos de gel con tapón amarillo deben mantenerse a temperatura ambiente y en posición vertical hasta que se complete la coagulación. Este período es de al menos 30 minutos. Debe ser un máximo de 1 hora.

¡ATENCIÓN! La fibrina formada en los tubos de suero almacenados horizontalmente puede adherirse a la tapa o las paredes laterales del tubo y no puede separarse del suero a pesar de haber sido centrifugado.

Aquellos con los mismos niveles en sangre en los tubos deben colocarse en las bandejas de centrífuga de manera equilibrada, si es necesario, se debe utilizar un tubo de equilibrio. Las tapas de los tubos deben mantenerse cerradas en todo momento. En tubos con tapa abierta, el pH aumenta debido a la pérdida de dióxido de carbono. El aumento del pH provoca resultados erróneos en algunas pruebas, y mantener la tapa del tubo cerrada durante la centrifugación también evita cambios en la concentración de analito debido a la evaporación.

La centrífuga debe detenerse mientras está funcionando. Cuando se escucha un sonido inesperado, vibración, olor a humo o humo, la centrífuga debe detenerse en el botón de parada. No se recomienda desenchufar la centrífuga o apagarla, ya que desactivará el sistema de frenos.

Las centrífugas utilizadas en el laboratorio generalmente advierten al usuario de manera audible cuando se completa el período de centrifugación programado. La centrífuga no debe abrirse ni forzarse a abrir la tapa sin detenerse y advertirle que la abra.

Las aplicaciones realizadas después de la centrifugación afectan la durabilidad de los parámetros a medir. Como regla general, se recomienda que el suero o plasma obtenido tras la centrifugación se separe de sus elementos celulares lo antes posible. Los tubos separadores de gel que se utilizan en la actualidad proporcionan comodidad al desconectar el suero / plasma del paquete de células.

Se recomienda que las muestras de suero / plasma separadas mantenidas a temperatura ambiente después de la centrifugación se estudien dentro de las 8 horas, y si no se pueden realizar dentro de las 8 horas, se deben almacenar en un refrigerador (2-8 ° C).

Teniendo en cuenta las propiedades de la barrera de gel utilizada por los fabricantes de tubos, se recomienda centrifugar los tubos con una cierta fuerza g. Si no se tiene en cuenta esta velocidad y tiempo recomendados, puede provocar que la barrera de gel no cumpla su función correctamente. Nuestro valor y tiempo de centrifugación recomendados para nuestros tubos es de 1800-2000 RCF (g) y un mínimo de 10 minutos. Además, se recomienda utilizar una centrífuga de rotor móvil en lugar de un rotor fijo para realizar completamente la separación del gel.

Dado que las centrífugas utilizadas en los laboratorios pueden tener diferentes diámetros, es importante ingresar un valor de RCF. Los dispositivos que no se pueden ingresar como un valor RCF deberán ingresar un valor de RPM. Incluso si el valor de RPM introducido aquí es el mismo, los valores de RCF a obtener serán más o menos de acuerdo con la longitud del diámetro de la centrífuga. Para ello, el personal del laboratorio recomienda la verificación antes de utilizar los tubos. Puede utilizar la siguiente formulación para trabajar a los valores RCF recomendados de acuerdo con el radio del rotor de la centrífuga a utilizar.

RPM=1000*√(RCF11.18*rcm) 

r: Diámetro del rotor de la centrífuga

RCF: Fuerza centrífuga relativa

RPM: Revoluciones por minuto

Dependiendo de la condición de la muestra tomada, a veces se recomienda utilizar una fuerza g más alta y un tiempo de centrifugación más largo si el movimiento del gel no es suficiente (especialmente debido a un valor de hematocrito superior al 50%).

La centrifugación debe realizarse en una centrífuga enfriada. Las temperaturas más altas pueden afectar negativamente a las propiedades físicas del gel. 20 ° C-22 ° C es ideal para rendimiento de suero o plasma.

Los tubos de separación de gel deben centrifugarse en un plazo máximo de 2 horas. El contacto prolongado de las células sanguíneas con el suero y el plasma produce resultados falsos. Una vez que se forma la barrera, no se recomienda repetir la centrifugación. La recentrifugación de los tubos puede resultar en una posible pérdida de las barreras de gel, haciendo que las partículas de gel se separen y aparezcan en el suero o el plasma.

Antes de enviar los tubos de gel por correo o sistema neumático, los tubos deben mantenerse en posición vertical durante aproximadamente una hora después de la centrifugación a temperatura ambiente para minimizar el daño a las barreras de gel por sacudidas repentinas.

La presión exterior también es diferente según los valores de altitud (altitud) del lugar donde se utilizarán los tubos. Esto hará que el tubo al vacío estándar recolecte menos muestra a grandes altitudes, ya que la presión externa será menor, y en altitudes bajas causará más recolección de muestras debido a la alta presión externa.

Por este motivo, se debe informar al fabricante con los valores de altitud, si es posible, teniendo en cuenta las regiones donde se utilizarán los tubos al realizar el pedido. Por lo tanto, al asegurarse de que los tubos se vacíen con los valores de vacío correctos de acuerdo con el lugar donde se utilizarán los tubos, se evitará la recolección incorrecta de la muestra y los resultados de prueba erróneos.

No se recomienda transferir una muestra de la jeringa al tubo. Presionar el émbolo de la jeringa durante la transferencia puede dañar las células sanguíneas, ya que moverá la muestra creando una presión positiva y esto puede causar condiciones como hemólisis. La presión dentro del tubo hará que la tapa se abra, haciendo que la muestra se esparza.

Inmediatamente después de la extracción de sangre, invierta lentamente los tubos y vuelva a colocarlos en posición vertical para asegurarse de que el aditivo y la sangre estén bien mezclados. Este doble movimiento es un ciclo completo. Preste atención al número de ciclos recomendados según los tubos utilizados.

No agite los tubos. La acción de agitación vigorosa puede causar formación de espuma o hemólisis. La mezcla insuficiente o retardada de los tubos de suero puede provocar una coagulación retardada. En el caso de tubos que contienen anticoagulantes, una mezcla insuficiente provocará acumulación de plaquetas, coagulación y / o resultados falsos de la prueba.

Después de mezclar, los tubos deben mantenerse en posición vertical. La fibrina formada en los tubos de suero almacenados horizontalmente puede adherirse a la tapa o las paredes laterales del tubo y no puede separarse del suero a pesar de haber sido centrifugado.

La centrifugación debe realizarse en una centrífuga enfriada. Las temperaturas más altas pueden afectar negativamente a las propiedades físicas del gel. 20 ° C-22 ° C es ideal para la eficacia del suero o plasma.

Los tubos de separación de gel deben centrifugarse en un plazo máximo de 2 horas. El contacto prolongado de las células sanguíneas con el suero y el plasma produce resultados falsos. Una vez que se forma la barrera, no se recomienda repetir la centrifugación. La re-centrifugación de los tubos puede resultar en una posible pérdida de las barreras de gel, haciendo que las partículas de gel se separen y aparezcan en el suero o el plasma.

Antes de enviar los tubos de gel por correo o sistema neumático, los tubos deben mantenerse en posición vertical durante aproximadamente una hora después de la centrifugación a temperatura ambiente para minimizar el daño a las barreras de gel por sacudidas repentinas.

Hemólisis: es la descomposición de los eritrocitos en la sangre y la mezcla de hemoglobina y otros contenidos en la sangre. La hemólisis afecta los resultados debido a la mezcla de sustancias eritrocitarias en el suero, la hemodilución y la interferencia química en algunas pruebas y provoca resultados erróneos. En este caso, el suero no es como debería ser, sino de un color rojo que se oscurece según la gravedad de la hemólisis.

Algunas de las pruebas más afectadas por la hemólisis se detallan a continuación.

Capacidad de unión a hierro, Lactato deshidrogenasa, Potasio, Urea, Fósforo, Alanina aminotransferasa, Bilirrubina, Cloruro, Sodio, Hierro, Aspartato aminotransferasa, Calcio, Creatina quinasa, Amilasa.

Lipemia: presencia de lípidos por encima de lo normal en suero o plasma. La lipemia se puede observar en muestras no en ayunas o en el suero o plasma de pacientes con hiperlipidemia. La turbidez, la densidad y el cambio de color en el suero lipémico pueden provocar resultados de prueba erróneos.

Ictericia: aumento de los niveles de bilirrubina en suero o plasma.

Algunas de las pruebas más afectadas por la ictericia son:

Colesterol total, Albúmina, Ácido úrico, Colesterol HDL, Ferritina

Aparte de estos parámetros, pueden obtenerse resultados erróneos en otras pruebas debido a la turbidez en el suero.

Situaciones como el ritmo biológico diario, el ejercicio, el hambre, la dieta, la medicación, el alcohol o el tabaquismo pueden afectar muchas pruebas de laboratorio. Las muestras lipémicas pueden obstruir las sondas del analizador y afectar algunos parámetros de prueba. Si bien se recomiendan 10-12 horas de ayuno especialmente para glucosa, panel de lípidos en sangre, fósforo, hierro, ferritina, ALP, ácido fólico y vitamina B12 en sangre, el período de ayuno no debe exceder las 16 horas. Durante el período de hambre, el agua se puede beber solo si es necesario.

Se recomienda evitar los ejercicios pesados ​​y extenuantes durante las 24 horas previas a los exámenes y que el paciente descanse media hora antes de la extracción de sangre. La carboxihemoglobina, las catecolaminas plasmáticas y el cortisol sérico aumentan en fumadores. Si bien los cambios en estas hormonas aumentan la cantidad de glóbulos blancos, como neutrófilos y monocitos, disminuyen la cantidad de células eosinófilas. Como resultado del tabaquismo crónico, la concentración de hemoglobina, el recuento de eritrocitos y leucocitos pueden aumentar. Si el uso regular de medicamentos está en duda debido a la enfermedad existente, no se debe suspender el uso de medicamentos, excepto por control y recomendación del médico.

Los resultados de las pruebas obtenidas varían en función de factores como los hábitos alimentarios, el estilo de nutrición, la calidad nutricional, los hábitos y estilo de ejercicio, la estructura genética, la estructura geográfica de la zona de vida.

Podemos agrupar las variables que afectan los resultados de la prueba bajo dos subtítulos principales como variables controlables como la postura del individuo, reposo en cama, ejercicio, tabaquismo y consumo de alcohol, y variables incontrolables como la edad y el sexo.

A- Variables controlables;

1. Postura

En un adulto, el volumen de sangre disminuye en aproximadamente un 10% (600-700 ml) cuando se pasa de la posición acostada a la vertical. Esta situación puede provocar un aumento de aproximadamente un 8-10% en la concentración de proteínas plasmáticas. Esta disminución del volumen plasmático puede provocar un aumento de los niveles de enzimas, hormonas proteicas y fármacos unidos a proteínas. Los cambios de postura también pueden causar cambios en los niveles de aldosterona, catecolaminas y hormona antidiurética.

2. reposo en cama prolongado

Durante el reposo prolongado en cama, los niveles de proteína y albúmina sérica disminuyen, los niveles de sustancias unidas a proteínas distintas del calcio sérico disminuyen y los niveles de calcio en sangre y orina aumentan como resultado de la movilización de calcio óseo.

3. Ejercicio

El ejercicio de intensidad moderada aumenta los niveles de glucosa en sangre y estimula la liberación de insulina. Después del ejercicio de baja intensidad, los niveles de lactato en sangre aumentan. Esto puede provocar cambios de pH del medio ambiente y afectar los resultados de la prueba. Se puede observar un aumento en los niveles de enzimas como CK, AST, LDH incluso en caminatas muy cortas. Al mismo tiempo, los niveles de algunas hormonas (T4, testosterona, LH, etc.) pueden aumentar después del ejercicio.

La actividad de las enzimas del músculo esquelético sérico de los atletas en reposo puede ser más alta que la de los individuos normales. Los niveles séricos de urea, ácido úrico, creatinina y tiroxina pueden ser más altos en los atletas.

Si bien el ejercicio físico provoca una disminución de los niveles de colesterol sérico hasta en un 25%, provoca un aumento de los niveles de HDL.

4. Cambio circadiano

La mayoría de los componentes de los fluidos corporales muestran cambios cíclicos o circadianos a lo largo del día. Los factores que contribuyen a estos cambios son la postura, la actividad, la nutrición, el estrés, la luz del día / oscuridad, el sueño / vigilia. Dado que este cambio es alto en algunos parámetros, se debe prestar atención al tiempo de recolección de la muestra. Por ejemplo, los niveles de hierro sérico pueden caer en un 50% hacia el mediodía.

El cortisol sérico alcanza su punto máximo en las horas de la mañana y baja en la tarde. Si bien la liberación de la hormona del crecimiento es máxima durante el sueño, disminuye con la vigilia.

5. Viajes

Los viajes de unas pocas horas pueden cambiar el ritmo circadiano. Durante el vuelo, mientras aumentan los niveles séricos de glucosa y triglicéridos, se estimula la secreción de glucocorticoides. El líquido y el sodio se retienen durante vuelos largos.

6. Nutrición

En caso de que se administre sangre sin ayunar, los parámetros más afectados (en la dirección de aumento) son la glucosa, el hierro, los lípidos totales y la fosfatasa alcalina. Después de una dieta alta en proteínas por la noche, se pueden observar aumentos en el nitrógeno ureico, el fosfato y el ácido úrico séricos incluso 12 horas después de la alimentación.

No solo la nutrición, sino también las sustancias en el contenido de los alimentos pueden afectar los resultados de las pruebas. La cafeína puede alterar la tolerancia a la glucosa, provocando que sea alta. Dos tazas de café pueden aumentar la concentración de ácidos grasos libres en plasma en un 30%. En la ingesta prolongada de cafeína, mientras que los niveles de colesterol total disminuyen ligeramente, los niveles de triglicéridos pueden aumentar. Mientras que el aguacate afecta la tolerancia a la glucosa al afectar la secreción de insulina, la cebolla reduce tanto la glucosa plasmática como la respuesta de la insulina a la glucosa.

La desnutrición puede causar una disminución en los niveles séricos de proteína total y albúmina, así como una disminución en los niveles de enzimas. Las hormonas tiroideas séricas pueden disminuir

7. Obesidad

Existe una correlación positiva entre los niveles de colesterol sérico y la obesidad. Los niveles séricos de ácido úrico aumentan en relación con el peso corporal en individuos de más de 80 kg. A medida que aumenta el peso corporal, los niveles séricos de LDH aumentan en ambos sexos. Mientras que los niveles séricos de AST, creatinina, hemoglobina y proteínas totales aumentan con el peso corporal en los hombres, los niveles séricos de calcio aumentan en las mujeres. Mientras que los niveles de insulina plasmática aumentan en pacientes obesos, la respuesta a la glucosa disminuye. Los niveles séricos de testosterona disminuyen en los hombres obesos.

8. Fumar

Los efectos de fumar en los resultados de las pruebas se relacionan con la cantidad de personas que fumaron y durante cuánto tiempo. Si bien la cantidad de eritrocitos en la sangre es alta en los fumadores, la cantidad de carboxihemoglobina en los fumadores empedernidos puede exceder el 10% de la hemoglobina total. Aumenta el recuento de leucocitos en sangre.

Fumar afecta la respuesta inmunológica. Mientras que los niveles séricos de IgA, IgG e IgM son más bajos en los fumadores en comparación con los no fumadores, los niveles de IgE son más altos. Se puede observar una ligera positividad en los niveles de CEA en fumadores.

9 ingesta de alcohol

La ingesta moderada de alcohol tiene poco efecto en las pruebas de laboratorio. La ingesta moderada de alcohol ligero provoca un aumento de los niveles de triglicéridos, glucosa, lactato y cortisol. Los niveles de GGT, AST y ALT pueden ser más altos en personas con consumo crónico de alcohol en comparación con la población sana.

10. Uso de medicamentos

Muchas drogas pueden afectar los resultados de las pruebas de laboratorio. Los efectos de los medicamentos utilizados en las pruebas se pueden aprender con el especialista de laboratorio. Si es necesario, se debe informar al laboratorio sobre los medicamentos que el paciente usa regularmente.

B- Variables incontrolables;

1. Edad

El rango de referencia de muchas pruebas varía según el grupo de edad. Por ejemplo, los niños en crecimiento y desarrollo tienen niveles más altos de proteínas plasmáticas, de enzimas relacionadas con los músculos y los huesos que los adultos. Los niveles séricos de urea, ácido úrico, triglicéridos y colesterol aumentan en los adultos, los niveles de enzimas son más bajos que en la adolescencia. En los ancianos, el aclaramiento de creatinina disminuye, la proteína en orina aumenta. La testosterona sérica disminuye en los hombres mayores de 50 años, la FSH y la LH aumentan y el estrógeno disminuye en las mujeres.

2. Género

Si bien no hay mucha diferencia entre los géneros en el período prepuberal, las enzimas séricas como ALP, ALT, AST, CK son más altas en los hombres después de la pubertad. Los niveles de albúmina sérica, calcio, magnesio y colesterol son más altos en los hombres. La hemoglobina y el hierro son más bajos en las mujeres. La ALP es alta en mujeres posmenopáusicas.

3. Embarazo

Los resultados de la prueba pueden variar según el aumento del volumen sanguíneo medio. Los niveles bajos de glucosa en la orina pueden ser positivos.

4. Cambios estacionales, factores ambientales

Algunos de los resultados de las pruebas de laboratorio pueden variar entre las temporadas de verano e invierno. Por ejemplo, la síntesis de vitamina D (1,25 dihidroxi colecalciferol) aumenta durante los meses de verano. Los niveles de hemoglobina son más altos en personas que viven en lugares elevados. Las características del área geográfica donde vive el individuo pueden cambiar los componentes de los fluidos corporales.

5. Fiebre

Muchos parámetros como glucosa, lípidos y ácido úrico, especialmente proteínas con carácter reactivo de fase aguda positivo y negativo, pueden verse afectados. También afecta las respuestas hormonales.

6. Transfusión

Con la administración de sangre total o plasma, puede ocurrir un aumento en las concentraciones de proteínas plasmáticas.

El valor de referencia son los valores obtenidos como resultado de mediciones u observaciones realizadas en el individuo o grupo de muestra definido. El rango de distribución de referencia se crea con la interpretación estadística de estos valores. Los resultados obtenidos en los laboratorios clínicos se interpretan teniendo en cuenta los valores del rango de referencia. Por tanto, se define el estado de salud o enfermedad de un individuo.

La determinación de los rangos de referencia se realiza de acuerdo con las recomendaciones del Comité Nacional de Estándares de Laboratorio Clínico (NCCLS) y la Federación Internacional de Química Clínica: IFCC. Asimismo, la selección de personas de referencia está estandarizada en documentos relacionados con NCLSS e IFCC. NCCLS luego cambió su nombre a Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).

Existe un rango de referencia determinado por el fabricante para cada prueba. Sin embargo, no podemos decir con qué precisión este rango refleja los valores de referencia de la sociedad en la que vivimos. Es cierto que los intervalos de referencia variarán dadas las diferencias socioeconómicas y geográficas entre sociedades. Por esta razón, cada laboratorio debe determinar los valores de referencia específicos de esa región para la comunidad de la región a la que sirve, de acuerdo con métodos estándar. Los fabricantes de kits también recomiendan que "cada laboratorio debe determinar su propio rango de referencia" después de dar valores de referencia en sus prospectos de kits.

El valor crítico (pánico) es el resultado de laboratorio que indica una situación potencialmente mortal y puede requerir una intervención urgente para que el paciente sobreviva. En los laboratorios, los términos valor de pánico o valor crítico se utilizan en términos de la salud, el seguimiento y el tratamiento del paciente cuando se observa un resultado muy por debajo o por encima de los valores de referencia o cuando hay un hallazgo que sugiere una infección grave.

En la siguiente tabla, se proporciona una tabla de ejemplo para los valores de pánico generalmente determinados. Aunque los valores aquí son valores medios, pueden variar según el bebé, el niño, el adulto e incluso el sexo. Por tanto, cada laboratorio debe determinar su propio rango de referencia.

Valores críticos de bioquímica (pánico):

Valores hematológicos críticos (pánico):

Valores hormonales críticos (pánico):